Realbest expres

Súbor reagencií pre rýchlu izoláciu DNA zo sterov epitelových buniek, ktorá trvá iba 15 minút! Pred začatím izolácie DNA, je nevyhnutné vybrať zo sady pre PCR série „RealBest“ zásobník s univerzálnou pozitívnou kontrolnou vzorkou (PKV).

1. Vybrať potrebný počet skúmaviek s lýzačným roztokom (podľa počtu pripravených vzoriek, vrátane negatívnej a pozitívnej kontroly). Označiť skúmavky, položiť ich do stojana.
2. Krátkou centrifugáciou odstrániť kvapky zo stien skúmaviek s prepravným roztokom obsahujúcim analyzovaný materiál.
3. Do skúmaviek s obsahom lýzačného roztoku pridať po 100 µl vzorky* pomocou špičiek s filtrom. *Pred vložením vzorky opakovaným pipetovaním (alebo premiešaním vortexom) resuspendovať sediment buniek, ktorý sa vytvoril v skúmavke s prepravným roztokom po centrifugácií, aby sa do izolácie dostala suspenzia buniek.
4. Do skúmavky s lyzačným roztokom označenej, ako pozitívna kontrola, pridať 100 µl pozitívnej kontrolnej vzorky (PKV).
5. Do skúmavky s lyzačným roztokom označenej, ako negatívna kontrola, pridať 100 µl negatívnej kontrolnej vzorky (NKV).
6. Skúmavky dôkladne uzatvoriť vrchnákmi a zabezpečiť uzáver na vrchnákoch.
7. Dôkladne vortexovať aspoň 10 sekúnd.
8. Vložiť skúmavky do vopred vyhriateho termostatu na 98°С a inkubovať 15 minút.
9. Po inkubácií je skúmavky nutné ochladiť na izbovú teplotu a centrifugovať pri 8000 otáčkach/min 1 min pri izbovej teplote.
10. Supernatant získaný centrifugáciou predstavuje vzorku DNA určenú na amplifikáciu. Takto spracované vzorky je možné skladovať pri izbovej teplote do dvoch dní alebo pri teplote (+2 až +8)°С najviac jeden týždeň.